近几十年来,随着生活水平的提高和人口的老龄化,糖尿病患病率出现世界性的上升趋势,对人群总体健康的危害程度已居慢性非传染性疾病的第3位。而在糖尿病患者中ED发病率更高达35%~75%,糖尿病患者在确诊后超过50%的人5~l0年内会发生。
因此在DM性ED研究领域提供一种稳定、可靠的DM性ED大鼠模型成为糖尿病ED研究的科研基础。口前普遍应用STZ诱导加APO筛选的方法制备DMED大鼠模型。本实验旨在探讨如何优化此模型的建矗。
链脲佐菌素通过自由基损伤p细胞,使p细胞功能受损,胰岛素合成减少,引发糖尿病。STZ建模具有耗时短、方法简便、易于掌握及重复性好的特点,短期内可诱导大量模型。本实验建模时做剑:
本实验采用阿扑吗啡筛选实验来评估实验动物的勃起功能。APO是一种多巴胺受体激动齐4,低剂量阿扑吗啡可通过下丘脑室旁核处的多巴胺受体引起阴茎勃起。有文献报道ED模型的筛选在DM成模2周或周时进行,本实验在糖尿病成模12周时进行筛选实验,相当于人患糖尿病6~8年左右,相比于其他造模方法,12周时筛选更符合人患糖尿病后发生的病理情况。在实验中发现,造模12周时DM大鼠阴茎包皮大多脂肪菲薄且退缩,阴茎头及体部露出,故判断勃起时,应确以阴茎根部露出为勃起1次,否则易有假阳性结果出现。从实验结果可知,颈部皮下注射APO后,NDM组和对照组大鼠勃起率为100%,而组大鼠勃起率为15.4%,糖尿病大鼠造模后12周大鼠的成模率达到了84.6%,达到了DM性ED大鼠模型的要求。
糖尿病可引起大鼠阴茎细胞凋亡增加,阴茎动脉的管腔变小和管壁增厚。海绵体组织继发纤维化,成为糖尿病导致大鼠勃起功能障碍的结构基础,由表造模后l2周时3组大鼠阴茎质量比较可得到支持。
同时由表2可知,DM组大鼠睾丸质量显著降低,体积减小,机制可能为糖尿病引起睾丸内微细血管及神经末梢病变,导致睾丸内部结构及微环境变化,使睾丸间质细胞生成雄激素的功能下降,而雄激素可支持阴茎的勃起功能,故推测睾丸质量的降低和大鼠勃起功能障碍之间有一定的相关性。
为降低实验动物死亡率,本实验采用远交群大鼠,该品系生长快,繁殖性能好,对性激素敏感,对呼吸疾病有较强的抵抗力,广泛用于药理、毒理、药效及GLP实验。实验全程在SPF级动物屏障系统进行,达到了实验环境的稳定、无菌,动物的饲养及饲料质量的稳定。且在尾静脉采血法测量血糖时,为避免用碘伏消毒影响血糖值的测定,采血部位运用70%酒精每天消毒2次。以上措施有效地降低了因实验环境的变化及实验操作引起感染而导致的动物死亡。
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